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UV-2100双光束紫外/可见分光光度计
[ 作者:Admin     来源:植物科学实验教学中心     更新时间:2006/10/25     文章录入:
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UV-2100双光束紫外/可见分光光度计操作规程


1、首先开启分光光度计电源(开关在仪器左侧面),钨灯自动点燃,经6秒左右,氘灯自动点燃,可听到声音。
2、开启显示器电源。然后开启计算机系统电源,计算机系统开机后首先进行一系列本系统自检,当自检完成后将自动进入windows操作系统。
3、启动UV-2100紫外可见分光光度计应用程序,软件将自动进入到自检画面。首次开机,应先预热30分钟,再进行仪器自检。
4、狭缝选择,狭缝选择项在仪器的自检画面的最上面,用鼠标选中要使用的狭缝,仪器自动控制切换狭缝;如果不选择,系统默认选择2nm狭缝。
5、按回车或用鼠标单击“开始”按钮,便可启动自检程序。自检完成后,按下“确定”键后,仪器可以进入正常测量工作。
6、点击工具栏上的“光谱”功能项,在菜单中点“设置-自动调节“,将自动设置最合适的范围,以使所有数据都能合适的显示在图形上。

一、 光谱扫描测量方式
1、点击工具栏上的“光谱”功能项,进入光谱扫描测量后,首先点击参数项,进行参数设置。
2、设置好参数后,将参比池和样品池都加入参比溶液,盖好样品室盖。按下下面显示窗“baseline”命令按钮,仪器将自动进行基线校正,不改变参比溶液和测量波长范围的情况下,只需校准一次。
3、在样品池中加入样品液,单击“测量”命令按钮,当进行样品扫描测量时,显示器上将会动态显示实时图谱,当前波长位置及对应的测量数据。在测量中途,若用户想中断实时测量,可单击“停止”按钮,便可中断测量,测量结束后,一切动态显示将停止。
4、 测量完成后,点击工具栏上的“标尺”,显示一垂直滚动条可观察数据。点击测量图谱右侧的“样品数据”也可观察数据。单击“保存”按钮可储存当前图谱。单击“打印”按钮,便可通过联接好的打印机打印出当前的扫描图谱。
5、在光谱扫描的页面右边有“导航器”与“样品数据”两个页面,点击可以进行显示切换。
6、 单击菜单栏的“数据处理”下的图谱处理菜单功能项,便可进行图谱处理。
(1)       标尺查数:选择工具栏上“标尺”钮或选择菜单“数据处理-标尺查数”选项,会出现一垂直滚动条,左右挪动鼠标,或按键盘方向键,可使标尺移动到要观察的测量点,当前标尺指示的测量点的数据将显示在右方的导航器中。
(2)  峰谷检测:单击“峰谷检测”按钮,在对话框中由数字键输入峰谷检测灵敏度数值,然后单击“确定”按钮,显示器上便显示出峰谷检测后的图谱,并在峰谷波长处做出标记绿“+”为峰,红“+”为谷,同时显示检测的峰谷数值,数据后面的P代表峰值,V代表谷值。(注:峰谷检测出的峰谷个数取决去所输入的检测灵敏度的大小)
(3) 单击“光谱变换”可以进行Abs<->T%转换、平滑、对数、倒数和最多四阶导数的计算。
7、 关机前退出应用程序,再关计算机电源。

二、 定波长测量方式
1、单击工具栏上“光度”菜单栏,便进入定波长测量方式。
2、进行参数设置,在此可选择测量方式和波长个数、输入波长值和平均次数,平均次数越多,测量的重复性越好。
3、在测量前,必须进行校准。设置好参数后,在参比池和样品池中加入参比溶液,盖好样品室盖;按下“Autozero”按钮,只要不改变参比溶液和测量波长范围的情况下,只需校准一次;在样品池中加入样品液,单击“测量”命令按钮,则进行测量操作。

三、 定量测量
(一)、击主菜单下按钮,进入定量测量方式后,点击“参数”按钮,进入参数选择对话框,选择单波长标准系数法
1.  浓度法
在定量测量参数设置对话框中,输入测量波长值,选择拟合方式,选择是否要将零点作为拟合的有效值,输入标样浓度个数,同时在浓度标样中输入对应的浓度值,设置完毕后,按下“确定”按钮,进入测量界面。
先在参比池和样品池中放入参比液进行校零,按下按钮,仪器将自动进行校准。

a)        按下按钮,此键将变成(此键用以切换标样与未知样的测量页面),同时进入浓度标样的测量界面,此时依照参数设置的标样值,在样品池中加入

对应的浓度标样,按下  ,输入此时浓度标样对应的标样号,确定后仪器开始测量,依次测量完所有的标样后,标准曲线也同时自动生成。

b)        用标样建立好曲线后,按下按钮,此键将变成 ,同时进入测量界面,在样品池中放入待测样品,按下 按钮,仪器开始测量。
 
2. 系数法

如果已知拟合函数,则直接将已知的函数参数输入其中,可以免除要测量标样的过程。

测量前首先进行校零,将参比池和样品池中放入参比溶液,按下,仪器将自动进行校零,然后可以进行测量。
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