细胞生物学是生命科学四大基础学科之一，它从细胞水平、亚细胞水平和分子水平三个不同层次上研究细胞的结构功能和生命活动的基本规律，位于分子生物学与个体生物学之间，同他们互相衔接，互相渗透。因此，细胞生物学又是一门承上启下的学科。细胞生物学实验课程教学以理论课教学为基础，理论与实践相结合，加深对所学知识的理解，对实验仪器要求较高，因此开设本课程的目的是使学生掌握细胞生物学实验设备的操作方法，使学生更加牢固地掌握基础知识，更重要的是培养学生的动手能力和科学研究能力，为学生学习生命科学中的其他相关课程作好基础准备。同时也使学生具备观察和研究细胞结构与功能的基本方法，学会发现问题和解决问题的基本技能，为毕业后从事生物学相关的科研和教学工作奠定基础。

该课程是生命科学相关专业学生的必修课程，也可作为非生命科学专业扩大知识视野的选修课程。

 

通过实验教学，使学生初步掌握制备植物细胞减数分裂玻片标本的技术和方法，了解石蜡切片的制作过程；初步掌握荧光染色的方法和原理，并熟悉荧光显微镜的使用；掌握细胞电融合方法和化学介导剂诱导细胞融合的原理和方法；了解细胞器的超活染色技术和组织化学技术；了解细胞器分离的一般原理和方法；掌握并熟练地使用各类常用的光学显微镜。

实验教学过程中，要求学生预习实验内容，掌握实验目的及设计思路，了解实验步骤；教师应该认真讲解，细心指导和演示；学生要认真观察实验现象，实事求是地记录实验数据和结果，经过积极的思考后，书写实验报告，报告内容简明扼要，结果翔实，并且分析实验中的一些现象；实验过程中要遵守实验规章制度，爱护实验财产和仪器设备，保持实验室卫生；教师应负责巡视检查实验课的各个环节，认真评阅实验报告，进行实验教学总结。

 

     学生对实验课的态度、操作技能和实验报告制作的平时考核及相应期末笔试相结合的综合评分，并以百分制计分。

 

 

序 号	实验项目 名称	实验 类型	实验 要求	适用 专业	课时
1	植物细胞的活体染色及观察	验证	选做	理学、农学	4
2	细胞膜的渗透性	验证	必做	理学、农学	4
3	叶绿体的分离与荧光观察	综合	必做	理学、农学	4
4	植物细胞骨架的光学显微镜观察	验证	必做	理学、农学	4
5	细胞融合	综合	必做	理学、农学	4
6	DNA的Feulgen染色法和PAS反应法显示多糖	综合	必做	理学、农学	4
7	膜蛋白质的分离	创新	选做	理学、农学	4
8	减数分裂中的染色体行为比较	设计	选作	理学、农学	4
9	电子显微镜技术	综合	选做	理学、农学	4
10	显微摄影与暗室技术	设计	必作	理学、农学	8

 

 

 

1.    实验目的和要求

1.1掌握植物细胞活体染色的原理和方法。

1.2比较染色后死细胞和活细胞的区别。

2.    实验内容

2.1植物组织的活体切片。

2.2利用中性红对装片进行染色。

2.3对死细胞和活细胞进行染色比较，观察。

3. 教学方式

教师讲解植物细胞活体染色的原理和方法。然后以每个学生为进行操作, 染色后镜检观察。

4. 考核要求

   掌握植物细胞活体染色的原理和方法。

 

 

 

1.      本次实验的目的和要求

了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。

2.      实验内容

将植物组织放入数种等渗溶液中，由于细胞膜对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高植物细胞的渗透压，引起质壁分离。由于溶质渗入速度不相同，因此质壁分离时间也不相同。

3.  教学方式

讲解细胞膜的渗透性特点，以及观察中注意事项和要领。学生动手和观察。

4. 考核要求

掌握细胞膜的渗透性特点和过程，对观察结果进行比较和分析。

 

 

1. 本次实验目的和要求

通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。

2. 实验内容

差速离心进行叶绿体的分离，自发荧光和次生荧光的观察。

3. 教学方式

讲解叶绿体分离的一般原理和方法、自发荧光和次生荧光产生的原理。学生进行叶绿体分离、制片和观察。

4. 考核要求

掌握叶绿体分离、自发荧光和次生荧光的产生的原理。学生自己动手进行叶绿体分离、制片和观察。

 

 

1. 本次实验目的和要求

学习用光学显微镜观察植物细胞内骨架的基本方法，了解植物细胞的骨架的结构特征。

2. 实验内容

当用适当浓度的Triton-X100处理时，可将细胞内蛋白质破坏，但细胞内骨架系统的蛋白质却被保存，后者用考马斯亮蓝R250染色，可在光学显微镜下观察到细胞骨架的网状结构。

3. 教学方式

讲解细胞骨架观察的一般原理和方法。学生进行细胞制片和观察。

4. 考核要求

掌握细胞骨架观察的原理。学生自己动手进行制片和观察。

 

1.    实验目的和要求

  掌握细胞电融合和利用聚乙二醇为介导剂进行融合的原理和方法。

2.    实验内容

  利用聚乙二醇（PEG）为媒介物进行细胞融合。

3. 教学方式

教师讲解细胞融合原理, 讲解并演示细胞融合仪的操作, 然后以4个学生为1组进行操作, 要求每个学生至少操作一次；教师讲解利用聚乙二醇（PEG）为媒介物进行细胞融合的原理和方法, 每人单独进行操作。

4. 考核要求

掌握利用聚乙二醇为介导剂进行细胞融合的原理和方法。

 

 

1        实验目的和要求

1.1 了解石蜡切片的制作过程；

1.2 学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理；

1.3 掌握PAS（高碘酸-希夫试剂）反应显示多糖的方法了，了解多糖在细胞内的分布及其特性。

2  实验内容

   2.1  DNA的Feulgen染色法

   2.2  PAS反应法显示多糖

3. 教学方式

讲解并演示石蜡切片的制作过程; DNA的Feulgen染色法和PAS反应法显示多糖的原理和方法, 学生自己动手进行染色和观察。

4. 考核要求

掌握DNA的Feulgen染色法和PAS反应法显示多糖的原理和方法, 并能单独进行染色和观察。

 

 

1   实验目的和要求

1.1 掌握不同膜蛋白质的分离和纯化的方法；

1.2 了解不同去垢剂的使用。

2   实验内容

2.1 先分离膜，然后提取；选用超声破碎法或酶处理法使得细胞破碎

2.2用特殊的去污剂选择性的分离。

2.3膜蛋白色谱(Chromatography of Membrane Protein,CMP)CMP+分离强疏水性蛋白、多肽混合物的层析系统，一般有去垢剂（如SDS）溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白，并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化，从而达到分级分离的目的。

3        教学方式

讲解膜蛋白质分离的一般原理和方法、去垢剂的原理和方法。学生进行膜蛋白质分离和纯化。

4．考核要求

掌握不同膜蛋白质的分离和纯化的方法；了解不同去垢剂的使用。学生自己动手进行膜蛋白质的分离和纯化。

 

1   实验目的和要求

1.1 掌握植物染色体的制片方法；

1.2 对植物细胞减数分裂的不同时期进行观察，比较其区别；

1.3 掌握植物细胞配子发生的基本过程。

2   实验内容

2.1观看示范制片了解减数分裂过程的分期和特征；

2.2水稻花药压片标本的制作与观察。

4        教学方式

讲解植物染色体的制片方法，观看示范制片了解减数分裂过程的分期和特征，进行水稻花药压片标本的制作示范。学生进行水稻花药压片标本的制作和观察。

4．考核要求

掌握制作染色体装片的方法，比较减数分裂中染色体行为的异同，了解植物配子发生的过程。

 

1   实验目的和要求

1.1了解透射和扫描电子显微镜的基本原理；

1.2掌握透射电镜样品制备；

1.3学习透射、扫描电子显微镜观察和摄影的基本方法。

2   实验内容

2.1观看示范制片了解透射和扫描电子显微镜的基本原理；

2.2水稻叶片透射电镜样品制备；

2.3学习透射、扫描电子显微镜观察和摄影的基本方法。

3  教学方式

教师讲解并组织学生观看示范制片了解透射和扫描电子显微镜的基本原理，学生进行透射电镜样品制备，并学习透射、扫描电子显微镜观察和摄影的基本方法。

4．考核要求

了解透射和扫描电子显微镜的基本原理，掌握透射电镜样品制备，并学习透射、扫描电子显微镜观察和摄影的基本方法。

 

 

1. 实验目的和要求

掌握各种显微镜的使用方法，了解半自动显微摄影机的基本结构，学会显微摄影的基本操作。初步学会配置显影液、定影液，印相与放大，以及正确使用暗室等技术。

2. 实验内容

（1）黑白胶卷显微摄影的操作步骤

（2）彩色胶卷显微摄影的操作步骤

（3）显影液、定影液的配置，印相与放大。

3. 教学方式

讲解半自动显微摄影机的基本结构以及显微摄影的基本操作和要领，学生动手操作。教师讲解印相与放大的基本原理和操作步骤，学生进行操作。

4.  考核要求

了解半自动显微摄影机的基本结构，学会显微摄影的基本操作。学会配置显影液、定影液，印相与放大，以及正确使用暗室等技术。